د Nature.com د لیدلو لپاره مننه. هغه براوزر نسخه چې تاسو یې کاروئ محدود CSS ملاتړ لري. د غوره پایلو لپاره، موږ د نوي براوزر کارولو سپارښتنه کوو (یا په انټرنیټ اکسپلورر کې د مطابقت حالت غیر فعال کړئ). په عین حال کې، د دوامداره ملاتړ ډاډ ترلاسه کولو لپاره، موږ به سایټ پرته له سټایلونو او جاواسکریپټ څخه وښیو.
د موډیک بدلون (MC) د څارویو ماډلونو رامینځته کول د MC مطالعې لپاره یو مهم اساس دی. د نیوزیلینډ څلور پنځوس سپینې خرگوشونه د شرم عملیاتو ګروپ، د عضلاتو امپلانټیشن ګروپ (ME ګروپ) او د نیوکلیوس پلپوسس امپلانټیشن ګروپ (NPE ګروپ) ویشل شوي وو. په NPE ګروپ کې، د انټرورټیبرل ډیسک د انټرولیټرل لمبر جراحي طریقې لخوا افشا شو او د پای پلیټ ته نږدې د L5 فقراتي بدن د سوري کولو لپاره ستنه وکارول شوه. NP د L1/2 انټرورټیبرل ډیسک څخه د سرنج په واسطه ایستل شو او په هغې کې داخل شو. په فرعي هډوکي کې سوري کول. د عضلاتو امپلانټیشن ګروپ او د شرم عملیاتو ګروپ کې د جراحي پروسیجرونه او د سوراخ کولو طریقې د NP امپلانټیشن ګروپ سره ورته وې. په ME ګروپ کې، د عضلاتو یوه ټوټه په سوري کې ځای پرځای شوه، پداسې حال کې چې د شرم عملیاتو ګروپ کې، هیڅ شی په سوري کې نه و ځای پرځای شوی. د عملیاتو وروسته، د MRI سکین کول او مالیکولر بیولوژیکي ازموینه ترسره شوه. د NPE ګروپ کې سیګنال بدل شو، مګر د شیم-آپریشن ګروپ او ME ګروپ کې د سیګنال کوم څرګند بدلون نه و. هسټولوژیکي مشاهدې ښودلې چې د امپلانټیشن په ځای کې د نسجونو غیر معمولي تکثیر لیدل شوی، او د NPE ګروپ کې د IL-4، IL-17 او IFN-γ څرګندونه زیاته شوې. د فرعي کونډرال هډوکي کې د NP امپلانټیشن کولی شي د MC حیواني ماډل جوړ کړي.
موډیک بدلونونه (MC) د ملا تیر پای پلیټونو او د هډوکي میرو سره نږدې زخمونه دي چې په مقناطیسي ریزونانس امیجنگ (MRI) کې لیدل کیږي. دا په هغو اشخاصو کې خورا عام دي چې اړوند نښې لري. ډیری مطالعاتو د ملا د ټیټ درد (LBP) 2,3 سره د تړاو له امله د MC اهمیت ټینګار کړی دی. de Roos et al.4 او Modic et al.5 په خپلواکه توګه لومړی د ملا د ښکته درد (LBP) سره د فرعي کانډرل سیګنال غیر معمولي درې مختلف ډولونه تشریح کړل. د موډیک ډول I بدلونونه د T1-وزن لرونکي (T1W) ترتیبونو کې هایپواینټینس او د T2-وزن لرونکي (T2W) ترتیبونو کې هایپراینټینس دي. دا زخم د هډوکي میرو کې د فشر پای پلیټونو او نږدې عصبي ګرانولیشن نسج څرګندوي. د موډیک ډول II بدلونونه په T1W او T2W ترتیبونو کې لوړ سیګنال ښیې. پدې ډول زخم کې، د پای پلیټونو ویجاړتیا موندل کیدی شي، او همدارنګه د نږدې هډوکي میرو د هسټولوژیکي غوړ ځای په ځای کول. د موډیک ډول III بدلونونه په T1W او T2W ترتیبونو کې ټیټ سیګنال ښیې. د پای پلیټونو سره سم سکلیروټیک زخمونه لیدل شوي 6. MC د نخاع یوه رنځپوهنه ناروغي ګڼل کیږي او د نخاع د ډیری تخریبي ناروغیو سره نږدې تړاو لري7,8,9.
د شته معلوماتو په پام کې نیولو سره، ډیری مطالعاتو د MC د ایټیولوژي او رنځپوهنې میکانیزمونو په اړه مفصل بصیرتونه وړاندې کړي دي. البرټ او نورو وړاندیز وکړ چې MC ممکن د ډیسک هرنیشن له امله رامینځته شي8. هو او نورو MC د شدید ډیسک تخریب ته منسوب کړ10. کروک د "داخلي ډیسک ماتیدو" مفهوم وړاندیز کړ، کوم چې وايي چې تکراري ډیسک صدمه ممکن د پای پلیټ کې مایکرو اوښکو لامل شي. د درز له جوړیدو وروسته، د نیوکلیوس پلپوسس (NP) لخوا د پای پلیټ ویجاړول ممکن د اتوماتیک غبرګون رامینځته کړي، کوم چې نور د MC11 پراختیا لامل کیږي. ما او نورو ورته نظر شریک کړ او راپور یې ورکړ چې د NP هڅول شوی اتومات معافیت د MC12 په رنځجنیسس کې کلیدي رول لوبوي.
د معافیت سیسټم حجرات، په ځانګړې توګه د CD4+ T مرستندویه لیمفوسایټس، د اتومات معافیت په رنځپوهنه کې مهم رول لوبوي13. په دې وروستیو کې کشف شوی Th17 فرعي سیټ د پرو انفلامیټري سایټوکین IL-17 تولیدوي، د کیموکین څرګندونه هڅوي، او په زیانمنو ارګانونو کې د T حجرات هڅوي ترڅو IFN-γ14 تولید کړي. Th2 حجرات هم د معافیت غبرګونونو رنځپوهنه کې یو ځانګړی رول لوبوي. د Th2 حجرو د استازي په توګه د IL-4 څرګندونه کولی شي د شدید معافیتولوژیکي پایلو لامل شي15.
که څه هم په MC16,17,18,19,20,21,22,23,24 باندې ډیری کلینیکي مطالعات ترسره شوي، لاهم د مناسبو څارویو تجربوي ماډلونو نشتوالی شتون لري چې کولی شي د MC پروسې تقلید وکړي چې ډیری وختونه په انسانانو کې پیښیږي او د ایټیولوژي یا نوي درملنې لکه هدف شوي درملنې تحقیق کولو لپاره کارول کیدی شي. تر دې دمه، د MC یوازې څو څارویو ماډلونه راپور شوي چې د اصلي رنځپوهنې میکانیزمونو مطالعه کوي.
د البرټ او ما لخوا وړاندیز شوي د اتوماتیک تیوري پراساس، دې مطالعې د خرگوش د MC ماډل د ډرل شوي فقري پای پلیټ ته نږدې د NP اتوماتیک لیږدولو سره رامینځته کړ. نور اهداف د څارویو ماډلونو هسټولوژیکي ځانګړتیاوې مشاهده کول او د MC په پراختیا کې د NP ځانګړي میکانیزمونه ارزول دي. د دې هدف لپاره، موږ د MC پرمختګ مطالعه کولو لپاره د مالیکولر بیولوژي، MRI، او هسټولوژیکي مطالعاتو په څیر تخنیکونه کاروو.
دوه خرگوش د جراحۍ په جریان کې د وینې بهېدو له امله مړه شول، او څلور خرگوش د MRI په جریان کې د بې هوشۍ په جریان کې مړه شول. پاتې ۴۸ خرگوش ژوندي پاتې شول او د جراحۍ وروسته یې هیڅ چلند یا عصبي نښې ونه ښودلې.
MRI ښیي چې په مختلفو سوریو کې د سرایت شوي نسج د سیګنال شدت توپیر لري. د NPE ګروپ کې د L5 فقراتي بدن د سیګنال شدت په تدریجي ډول د داخلولو وروسته په 12، 16 او 20 اونیو کې بدل شو (د T1W ترتیب ټیټ سیګنال ښودلی، او د T2W ترتیب مخلوط سیګنال او ټیټ سیګنال ښودلی) (انځور 1C)، پداسې حال کې چې د سرایت شوي برخو د نورو دوو ګروپونو MRI څرګندونه په ورته موده کې نسبتا مستحکم پاتې شوه (انځور 1A، B).
(الف) د خرگوش د کمر د ملا تیر د درې ځله وخت په وخت کې د سیګنالونو د ترتیب پرله پسې MRIs استازیتوب کوي. د شیم-آپریشن ګروپ په عکسونو کې هیڅ سیګنال غیر معمولي نه دي موندل شوي. (ب) د ME ګروپ کې د ملا تیر د بدن د سیګنال ځانګړتیاوې د شیم-آپریشن ګروپ سره ورته دي، او د وخت په تیریدو سره د سیګنال په ځای کې د پام وړ بدلون نه لیدل کیږي. (ج) د NPE ګروپ کې، ټیټ سیګنال په T1W ترتیب کې په څرګنده توګه لیدل کیږي، او مخلوط سیګنال او ټیټ سیګنال په T2W ترتیب کې په څرګنده توګه لیدل کیږي. د 12 اونیو مودې څخه تر 20 اونیو مودې پورې، د T2W ترتیب کې د ټیټ سیګنالونو شاوخوا ناڅاپي لوړ سیګنالونه کمیږي.
د NPE ګروپ کې د ملا تیر د بدن د امپلانټیشن په ځای کې د هډوکي څرګند هایپرپلاسیا لیدل کیدی شي، او د هډوکي هایپرپلاسیا د NPE ګروپ په پرتله د 12 څخه تر 20 اونیو پورې ګړندی پیښیږي (شکل 2C)، په ماډل شوي ملا تیر بدنونو کې هیڅ د پام وړ بدلون نه لیدل کیږي؛ د شام ګروپ او ME ګروپ (شکل 2C) 2A، B).
(الف) د امپلانټ شوي برخې په برخه کې د ملا تیر د بدن سطحه ډیره نرمه ده، سوری ښه روغیږي، او په ملا تیر کې هیڅ هایپرپلاسیا نشته. (ب) د ME ګروپ کې د امپلانټ شوي ځای شکل د جعلي عملیاتو ګروپ سره ورته دی، او د وخت په تیریدو سره د امپلانټ شوي ځای په بڼه کې هیڅ څرګند بدلون نه راځي. (ج) د NPE ګروپ کې د امپلانټ شوي ځای کې د هډوکي هایپرپلاسیا رامنځته شوه. د هډوکي هایپرپلاسیا په چټکۍ سره زیاته شوه او حتی د انټرورټیبرل ډیسک له لارې د متضاد ملا تیر بدن ته غځول شوې.
د هډوکو د جوړښت په اړه د هډوکو د هډوکو د جوړښت په اړه نور تفصيلي معلومات وړاندې کوي. شکل 3 د H&E سره رنګ شوي د عملیاتو وروسته برخو عکسونه ښیې. د شیم-آپریشن ګروپ کې، کونډروسایټونه ښه تنظیم شوي وو او د حجرو هیڅ تکثیر نه و موندل شوی (انځور 3A). د ME ګروپ کې وضعیت د شیم-آپریشن ګروپ (انځور 3B) سره ورته و. په هرصورت، په NPE ګروپ کې، د امپلانټیشن سایټ کې د کونډروسایټونو لوی شمیر او د NP په څیر حجرو تکثیر لیدل شوی (انځور 3C)؛
(الف) ټریبیکولا د پای پلیټ ته نږدې لیدل کیدی شي، کونډروسایټونه په ښه توګه د یوشان حجرو اندازې او شکل سره تنظیم شوي او هیڅ تکثیر نلري (۴۰ ځله). (ب) د ME ګروپ کې د امپلانټیشن سایټ حالت د شیم ګروپ سره ورته دی. ټریبیکولا او کونډروسایټونه لیدل کیدی شي، مګر د امپلانټیشن سایټ کې هیڅ څرګند تکثیر شتون نلري (۴۰ ځله). (ب) دا لیدل کیدی شي چې کونډروسایټونه او NP ته ورته حجرات د پام وړ وده کوي، او د کونډروسایټونو شکل او اندازه غیر مساوي ده (۴۰ ځله).
د انټرلیوکین ۴ (IL-4) mRNA، انټرلیوکین ۱۷ (IL-17) mRNA، او انټرفیرون γ (IFN-γ) mRNA څرګندونه په NPE او ME دواړو ګروپونو کې لیدل شوې. کله چې د هدف جینونو د څرګندولو کچه پرتله شوه، د IL-4، IL-17، او IFN-γ د جین څرګندونه د NPE ګروپ کې د ME ګروپ او د شرم عملیات ګروپ (شکل 4) (P < 0.05) په پرتله د پام وړ لوړه شوه. د شرم عملیات ګروپ سره پرتله کول، د ME ګروپ کې د IL-4، IL-17، او IFN-γ د څرګندولو کچه یوازې یو څه زیاته شوه او احصایوي بدلون ته ونه رسیده (P > 0.05).
د NPE ګروپ کې د IL-4، IL-17 او IFN-γ د mRNA څرګندونه د جعلي عملیاتو ګروپ او ME ګروپ (P < 0.05) په پرتله د پام وړ لوړه رجحان ښودلی.
په مقابل کې، د ME ګروپ کې د اظهار کچه هیڅ د پام وړ توپیر نه دی ښودلی (P>0.05).
د لویدیځ بلاټ تحلیل د IL-4 او IL-17 په وړاندې د سوداګریزو موجودو انټي باډیزونو په کارولو سره ترسره شو ترڅو د بدل شوي mRNA څرګندولو نمونې تایید کړي. لکه څنګه چې په شکل 5A، B کې ښودل شوي، د ME ګروپ او د شرم عملیاتو ګروپ سره پرتله کول، د NPE ګروپ کې د IL-4 او IL-17 پروټین کچه د پام وړ لوړه شوې (P < 0.05). د شرم عملیاتو ګروپ سره پرتله کول، د ME ګروپ کې د IL-4 او IL-17 پروټین کچه هم د احصایوي پلوه د پام وړ بدلونونو ته رسیدو کې پاتې راغله (P> 0.05).
(الف) د NPE ګروپ کې د IL-4 او IL-17 د پروټین کچه د ME ګروپ او پلیسبو ګروپ په پرتله د پام وړ لوړه وه (P < 0.05). (ب) ویسټرن بلاټ هسټوګرام.
د جراحي په جریان کې د ترلاسه شویو محدود شمیر انساني نمونو له امله، د MC د رنځپوهنې په اړه روښانه او مفصلې مطالعې یو څه ستونزمنې دي. موږ هڅه وکړه چې د MC د څارویو ماډل رامینځته کړو ترڅو د هغې احتمالي رنځپوهنیز میکانیزمونه مطالعه کړو. په ورته وخت کې، د NP آټوګرافټ لخوا هڅول شوي MC کورس تعقیبولو لپاره راډیولوژیکي ارزونه، هسټولوژیکي ارزونه او مالیکولر بیولوژیکي ارزونه وکارول شوه. په پایله کې، د NP امپلانټیشن ماډل د 12 اونیو څخه تر 20 اونیو پورې د سیګنال شدت کې تدریجي بدلون رامینځته کړ (په T1W ترتیبونو کې مخلوط ټیټ سیګنال او په T2W ترتیبونو کې ټیټ سیګنال)، د نسج بدلونونه په ګوته کوي، او د هسټولوژیکي او مالیکولر بیولوژیکي ارزونو د راډیولوژیکي مطالعې پایلې تایید کړې.
د دې تجربې پایلې ښیي چې د NPE ګروپ کې د ملا تیر د بدن د سرغړونې په ځای کې بصري او هسټولوژیکي بدلونونه رامنځته شوي. په ورته وخت کې، د IL-4، IL-17 او IFN-γ جینونو څرګندونه، او همدارنګه د IL-4، IL-17 او IFN-γ څرګندونه لیدل شوې، چې دا په ګوته کوي چې د ملا تیر په بدن کې د آټولوګس نیوکلیوس پلپوسس نسج سرغړونه ممکن د سیګنال او مورفولوژیکي بدلونونو لړۍ رامینځته کړي. دا موندل اسانه دي چې د څارویو ماډل د ملا تیر د بدنونو د سیګنال ځانګړتیاوې (د T1W ترتیب کې ټیټ سیګنال، مخلوط سیګنال او د T2W ترتیب کې ټیټ سیګنال) د انسان د ملا تیر حجرو سره ډیر ورته دي، او د MRI ځانګړتیاوې هم د هسټولوژي او ناخالص اناتومي مشاهدې تاییدوي، دا ده چې د ملا د بدن په حجرو کې بدلونونه پرمختللی دي. که څه هم د شدید صدمې له امله رامینځته شوی التهابي غبرګون ممکن د پنکچر وروسته ژر څرګند شي، د MRI پایلو ښودلې چې په تدریجي ډول د سیګنال بدلونونه د پنکچر څخه 12 اونۍ وروسته څرګند شول او تر 20 اونیو پورې دوام وکړ پرته له دې چې د MRI بدلونونو د بیا رغونې یا بیرته راګرځیدو نښې نښانې ولري. دا پایلې ښیي چې د اتولوګس فقراتي NP په خرگوش کې د مترقي MV رامینځته کولو لپاره یو باوري میتود دی.
د دې پنکچر ماډل کافي مهارت، وخت او جراحي هڅو ته اړتیا لري. په لومړنیو تجربو کې، د پاراورټیبرل لیګامینټوس جوړښتونو تحلیل یا ډیر محرک ممکن د فقري اوستیوفایټونو رامینځته کیدو لامل شي. پاملرنه باید وشي چې نږدې ډیسکونو ته زیان ونه رسوي یا خارښ ونه کړي. څرنګه چې د ننوتلو ژوروالی باید د دوامداره او بیا تولید وړ پایلو ترلاسه کولو لپاره کنټرول شي، موږ په لاسي ډول د 3 ملي میتر اوږدې ستنې د پوښ په پرې کولو سره یو پلګ جوړ کړ. د دې پلګ کارول د فقري بدن کې د برمه کولو یو شان ژوروالی تضمینوي. په لومړنیو تجربو کې، په عملیاتو کې ښکیلو دریو ارتوپيدي جراحانو وموندله چې 16 ګیج ستنې د 18 ګیج ستنو یا نورو میتودونو په پرتله د کار کولو لپاره اسانه دي. د برمه کولو پرمهال د ډیرې وینې بهیدو څخه مخنیوي لپاره، د ستنې د یو څه وخت لپاره ساتل به د ننوتلو لپاره ډیر مناسب سوري چمتو کړي، وړاندیز کوي چې د MC یو ټاکلی درجې پدې ډول کنټرول کیدی شي.
که څه هم ډیری مطالعاتو MC په نښه کړی دی، د MC25,26,27 د ایټیولوژي او رنځپوهنې په اړه لږ څه پیژندل شوي دي. زموږ د پخوانیو مطالعاتو پراساس، موږ وموندله چې اتومات معافیت د MC12 په رامینځته کیدو او پراختیا کې کلیدي رول لوبوي. دې مطالعې د IL-4، IL-17، او IFN-γ کمیتي څرګندونې معاینه کړې، کوم چې د انټيجن محرک وروسته د CD4+ حجرو اصلي توپیر لارې دي. زموږ په څیړنه کې، د منفي ګروپ په پرتله، د NPE ګروپ د IL-4، IL-17، او IFN-γ لوړ څرګندونې درلودې، او د IL-4 او IL-17 پروټین کچه هم لوړه وه.
په کلینیکي توګه، د ډیسک هیرنیشن ناروغانو څخه د NP حجرو کې د IL-17 mRNA څرګندونه زیاته شوې ده28. د صحي کنټرولونو په پرتله د حاد غیر فشاري ډیسک هیرنیشن ماډل کې د IL-4 او IFN-γ څرګندولو کچه هم لوړه شوې29. IL-17 د اتومیمون ناروغیو کې د سوزش، نسج ټپي کیدو کې کلیدي رول لوبوي30 او IFN-γ31 ته د معافیت غبرګون لوړوي. د IL-17 منځګړیتوب شوي نسج ټپي کیدو راپور په MRL/lpr موږکانو32 او اتوماتیک معافیت حساس موږکانو33 کې ورکړل شوی. IL-4 کولی شي د پرو انفلامیټري سایټوکینونو (لکه IL-1β او TNFα) او میکروفیج فعالولو34 څرګندیدو مخه ونیسي. راپور ورکړل شوی چې د IL-4 د mRNA څرګندونه په NPE ګروپ کې د IL-17 او IFN-γ په پرتله په ورته وخت کې توپیر درلود؛ د NPE ګروپ کې د IFN-γ د mRNA څرګندونه د نورو ډلو په پرتله د پام وړ لوړه وه. له همدې امله، د IFN-γ تولید ممکن د NP انټرکلیشن لخوا رامینځته شوي د التهابي غبرګون منځګړی وي. مطالعاتو ښودلې ده چې IFN-γ د څو ډوله حجرو لخوا تولید کیږي، په شمول د فعال شوي ډول 1 مرستندویه T حجرو، طبیعي وژونکي حجرو، او میکروفیجونو 35,36، او یو مهم پرو التهابي سایټوکین دی چې د معافیت غبرګونونه هڅوي 37.
دا څیړنه وړاندیز کوي چې د MC په رامینځته کیدو او پراختیا کې ممکن د اتومیمون غبرګون شامل وي. لووما او نورو وموندله چې د MC او مخکښ NP سیګنال ځانګړتیاوې په MRI کې ورته دي، او دواړه په T2W ترتیب کې لوړ سیګنال ښیې 38. ځینې سایټوکینونه د MC د پیښې سره نږدې تړاو لري تایید شوي، لکه IL-139. ما او نورو وړاندیز وکړ چې د NP پورته یا ښکته خپریدل ممکن د MC12 په پیښې او پراختیا کې لوی نفوذ ولري. بوبیچکو 40 او هرزبین او نورو 41 راپور ورکړ چې NP یو معافیتي نسج دی چې نشي کولی د زیږون څخه د رګونو جریان ته ننوځي. د NP پروټروژن بهرني بدنونه د وینې رسولو ته معرفي کوي، په دې توګه د محلي اتوماتیک غبرګونونو منځګړیتوب کوي 42. د اتوماتیک غبرګونونه کولی شي د معافیت ډیری عوامل رامینځته کړي، او کله چې دا عوامل په دوامداره توګه نسجونو ته ښکاره شي، دوی کولی شي په سیګنال کې بدلونونه رامینځته کړي 43. پدې څیړنه کې، د IL-4، IL-17 او IFN-γ ډیر څرګندیدل د معافیت ځانګړي عوامل دي، چې د NP او MCs ترمنځ نږدې اړیکه نوره هم ثابتوي 44. د څارویو دا ماډل د NP پرمختګ او پای پلیټ ته د ننوتلو ښه تقلید کوي. دې پروسې په MC باندې د اتومات معافیت اغیز نور هم څرګند کړ.
لکه څنګه چې تمه کیده، دا د څارویو ماډل موږ ته د MC مطالعې لپاره یو ممکنه پلیټ فارم چمتو کوي. په هرصورت، دا ماډل لاهم ځینې محدودیتونه لري: لومړی، د څارویو د څارنې په مرحله کې، ځینې منځنۍ مرحلې خرگوش باید د هسټولوژیکي او مالیکولر بیولوژي ازموینې لپاره euthanized شي، نو ځینې څاروي د وخت په تیریدو سره "له کارونې څخه بهر کیږي". دوهم، که څه هم پدې څیړنه کې درې وخت ټکي ټاکل شوي، له بده مرغه، موږ یوازې د MC یو ډول (موډیک ډول I بدلون) ماډل کړی، نو دا د انسان د ناروغۍ پراختیا پروسې استازیتوب کولو لپاره کافي ندي، او د ټولو سیګنال بدلونونو ښه لیدلو لپاره ډیر وخت ټکي باید تنظیم شي. دریم، د نسج جوړښت کې بدلونونه په حقیقت کې د هسټولوژیکي رنګ کولو لخوا په روښانه توګه ښودل کیدی شي، مګر ځینې ځانګړي تخنیکونه کولی شي پدې ماډل کې د مایکروسټرکچر بدلونونه په ښه توګه څرګند کړي. د مثال په توګه، د خرگوش انټرورټیبرل ډیسکونو کې د فایبروکارټیلج جوړښت تحلیل کولو لپاره قطبي شوي رڼا مایکروسکوپي کارول شوې وه45. په MC او پای پلیټ باندې د NP اوږدمهاله اغیزې نورې مطالعې ته اړتیا لري.
د نیوزیلینډ څلور پنځوس نارینه سپین خرگوش (وزن شاوخوا 2.5-3 کیلوګرامه، عمر 3-3.5 میاشتې) په ناڅاپي ډول د جعلي عملیاتو ګروپ، د عضلاتو د امپلانټیشن ګروپ (ME ګروپ) او د اعصابو د ریښو د امپلانټیشن ګروپ (NPE ګروپ) ویشل شوي وو. ټولې تجربوي پروسیجرونه د تیانجین روغتون د اخلاقو کمیټې لخوا تصویب شوي، او تجربوي میتودونه د تصویب شوي لارښوونو سره سم په کلکه ترسره شوي.
د S. Sobajima 46 د جراحي تخنیک کې ځینې پرمختګونه شوي دي. هر خرگوش په یوه اړخیزه آرامۍ موقعیت کې ځای پر ځای شوی و او د پنځه پرله پسې lumbar intervertebral discs (IVDs) مخکینۍ سطحه د posterolateral retroperitoneal طریقې په کارولو سره افشا شوه. هر خرگوش ته عمومي انستیزیا ورکړل شوه (20٪ urethane، 5 ml/kg د غوږ رګ له لارې). د پسونو د ښکته څنډې څخه د حوصلې کنډک ته د اوږدمهاله پوستکي چیرا جوړه شوه، د پاراورټیبرل عضلاتو ته 2 سانتي متره وینټرل. د L1 څخه تر L6 پورې ښي انټرو لیټرل نخاع د فرعي پوستکي نسج، ریټرو پیریټونیل نسج، او عضلاتو د تیز او خړ تحلیل لخوا افشا شوه (انځور 6A). د ډیسک کچه د حوصلې کنډک په کارولو سره د L5-L6 ډیسک کچې لپاره د اناتوميکي نښه په توګه ټاکل شوې وه. د L5 vertebra د پای پلیټ ته نږدې د 3 ملي میتر ژوروالي پورې د سوري ډرل کولو لپاره د 16 ګیج پنکچر ستنې څخه کار واخلئ (انځور 6B). د L1-L2 انټرورټیبرل ډیسک (انځور 6C) کې د آټولوګس نیوکلیوس پلپوسس د ایسپیریټ کولو لپاره د 5 ملی لیتر سرنج څخه کار واخلئ. د هر ګروپ اړتیاو سره سم نیوکلیوس پلپوسس یا عضلات لرې کړئ. وروسته له دې چې د ډرل سوري ژور شي، د جذب وړ سیونونه په ژور فاشیا، سطحي فاشیا او پوستکي کې ځای پر ځای کیږي، پاملرنه کیږي چې د جراحي په جریان کې د فقري بدن د پیریوسټیل نسج ته زیان ونه رسوي.
(الف) د L5-L6 ډیسک د پوسټرو لیټرل ریټروپیریټونیل طریقې له لارې ښکاره کیږي. (ب) د L5 پای پلیټ ته نږدې د سوري کولو لپاره د 16 ګیج ستنې څخه کار واخلئ. (ج) د اتولوګس MFs راټولیږي.
عمومي بې هوشي د غوږ د رګ له لارې د ۲۰٪ یوریتین (۵ ملی لیتر/کیلوګرام) په کارولو سره ورکړل شوه، او د ملا د نخاع راډیوګرافونه د عملیاتو وروسته په ۱۲، ۱۶ او ۲۰ اونیو کې تکرار شول.
خرگوش د جراحي وروسته په ۱۲، ۱۶ او ۲۰ اونیو کې د کیټامین (۲۵.۰ ملی ګرامه/کیلوګرامه) او د رګونو له لارې د سوډیم پینټوباربیټل (۱.۲ ګرامه/کیلوګرامه) د انټرماسکولر انجیکشن له لارې قرباني شول. د هسټولوژیکي تحلیل لپاره ټوله نخاع لرې شوه او ریښتینې تحلیل ترسره شو. د معافیت عواملو کې د بدلونونو کشفولو لپاره کمیتي ریورس ټرانسکرپشن (RT-qPCR) او ویسټرن بلاټینګ کارول شوي.
د خرگوشانو د MRI معاینات د 3.0 T کلینیکي مقناطیس (GE طبي سیسټمونه، فلورنس، SC) په کارولو سره ترسره شول چې د اورتوګونل غړو کویل ریسیور سره سمبال وو. خرگوشانو ته د غوږ رګ له لارې د 20٪ یوریتین (5 ملی لیتر / کیلوګرام) سره بې هوشي ورکړل شوه او بیا د مقناطیس دننه د 5 انچ قطر ګرد سطحي کویل (GE طبي سیسټمونه) په مرکز کې د لمبر سیمې سره د مقناطیس دننه ځای پر ځای شو. د کورونل T2 وزن لرونکي ځایی کونکي عکسونه (TR، 1445 ms؛ TE، 37 ms) د L3-L4 څخه تر L5-L6 پورې د لمبر ډیسک موقعیت تعریفولو لپاره ترلاسه شول. د سیګیټل الوتکې T2 وزن لرونکي ټوټې د لاندې ترتیباتو سره ترلاسه شوې: د 2200 ms د تکرار وخت (TR) او د 70 ms د ایکو وخت (TE) سره د چټک سپن-ایکو ترتیب، میټریکس؛ د 260 او اتو محرکاتو لید ساحه؛ د پرې کولو ضخامت 2 ملي میتر و، تشه 0.2 ملي میتر وه.
وروسته له هغه چې وروستی عکس واخیستل شو او وروستی خرگوش ووژل شو، د هسټولوژیکي معاینې لپاره د شمع، عضلاتو سره ځای پرځای شوي، او NP ډیسکونه لرې شول. نسجونه د یوې اونۍ لپاره په 10٪ غیر جانبدار بفر شوي فارملین کې تنظیم شوي، د ایتیلینیډیامینیټرااسیټیک اسید سره ډیکلسیفید شوي، او پارافین برخې شوي. د نسج بلاکونه په پارافین کې ځای پرځای شوي او د مایکروټوم په کارولو سره د ساګیټل برخو (5 μm ضخامت) کې پرې شوي. برخې د هیماتوکسیلین او ایوسین (H&E) سره رنګ شوي.
د هر ګروپ له خرگوشانو څخه د انټرورټیبرل ډیسکونو راټولولو وروسته، ټول RNA د UNIQ-10 کالم (شانګهای سانګون بایو ټیکنالوژۍ شرکت، لمیټډ، چین) په کارولو سره د جوړونکي لارښوونو او د ImProm II ریورس ټرانسکرپشن سیسټم (پرومیګا انکارپوریشن، میډیسن، WI، USA) سره سم استخراج شو. ریورس ټرانسکرپشن ترسره شو.
RT-qPCR د جوړونکي د لارښوونو سره سم د Prism 7300 (Applied Biosystems Inc., USA) او SYBR Green Jump Start Taq ReadyMix (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA) په کارولو سره ترسره شو. د PCR تعامل حجم 20 μl و او د هر پرائمر 1.5 μl رقیق شوي cDNA او 0.2 μM پکې شامل وو. پرائمرونه د OligoPerfect ډیزاینر (Invitrogen, Valencia, CA) لخوا ډیزاین شوي او د Nanjing Golden Stewart Biotechnology Co., Ltd. (China) لخوا تولید شوي (جدول 1). لاندې د تودوخې سایکل چلولو شرایط کارول شوي: د پولیمریز فعالولو لومړنی ګام په 94°C کې د 2 دقیقو لپاره، بیا د 15 ثانیو 40 دورې په 94°C کې د ټیمپلیټ ډینیټوریشن لپاره، د 1 دقیقو لپاره په 60°C کې انیل کول، توسیع، او فلوروسینس. اندازه کول د 1 دقیقو لپاره په 72°C کې ترسره شوي. ټولې نمونې درې ځله پراخه شوې او د RT-qPCR تحلیل لپاره اوسط ارزښت کارول شوی و. د پراخوالي معلومات د فلیکس سټیشن 3 (مالیکولر وسایل، سني ویل، CA، USA) په کارولو سره تحلیل شوي. IL-4، IL-17، او IFN-γ جین څرګندونه د انډوجینس کنټرول (ACTB) ته نورمال شوي. د هدف mRNA نسبي څرګندونه کچه د 2-ΔΔCT میتود په کارولو سره محاسبه شوې.
ټول پروټین د نسجونو څخه د نسجونو هوموجنیزر په کارولو سره د RIPA لیسیز بفر (چې د پروټیز او فاسفیټیس مخنیوی کوکټیل لري) کې استخراج شو او بیا د نسجونو د کثافاتو لرې کولو لپاره په 4 درجو سانتیګراد کې د 20 دقیقو لپاره په 13,000 rpm کې سینټرفیوج شو. د هر لین پنځوس مایکروګرام پروټین بار شوي، د 10٪ SDS-PAGE لخوا جلا شوي، او بیا د PVDF غشا ته لیږدول شوي. بلاک کول په 5٪ غیر غوړ وچ شیدو کې د Tris-buffered saline (TBS) کې ترسره شوي چې 0.1٪ Tween 20 لري د خونې په حرارت کې د 1 ساعت لپاره. غشا د خرگوش ضد ډیکورین لومړني انټي باډي (1:200 منحل شوی؛ بوسټر، ووهان، چین) (1:200 منحل شوی؛ بایوس، بیجینګ، چین) سره د شپې په 4 درجو سانتیګراد کې انکیوبیټ شوی او په دوهمو ورځو کې یې غبرګون وښود؛ د ثانوي انټي باډي سره (د وزې ضد خرگوش امیونوګلوبولین G په 1:40,000 رقیق کې) د هارسریډش پیرو آکسیډیز (بوسټر، ووهان، چین) سره یوځای د خونې په تودوخه کې د 1 ساعت لپاره. د ایکس رې شعاع وروسته د کیمیلومینیسینټ غشا کې د کیمیلومینیسینس زیاتوالي لخوا د لویدیځ بلاټ سیګنالونه کشف شول. د کثافت تحلیل لپاره، بلاټونه د بینډ سکین سافټویر په کارولو سره سکین او اندازه شوي او پایلې د هدف جین معافیتي فعالیت او ټیوبلین معافیتي فعالیت تناسب په توګه څرګندې شوې.
احصایوي محاسبې د SPSS16.0 سافټویر پیکج (SPSS، USA) په کارولو سره ترسره شوې. د مطالعې په جریان کې راټول شوي معلومات د اوسط ± معیاري انحراف (اوسط ± SD) په توګه څرګند شوي او د دوه ډلو ترمنځ توپیرونو ټاکلو لپاره د یو اړخیز تکرار اقداماتو تحلیل (ANOVA) په کارولو سره تحلیل شوي. P < 0.05 د احصایوي پلوه مهم ګڼل کیده.
په دې توګه، د ملا د بدن په داخل کې د اوټولوګس NPs د لګولو او د میکرو اناتومیکل مشاهدې، MRI تحلیل، هسټولوژیکي ارزونې او مالیکولر بیولوژیکي تحلیل ترسره کولو سره د MC د څارویو ماډل رامینځته کول ممکن د انسان د MC میکانیزمونو ارزونې او پوهیدو او د نوي درملنې مداخلو رامینځته کولو لپاره یو مهم وسیله شي.
دا مقاله څنګه حواله کړو: هان، سي. او نور. د موډیک بدلونونو یو څاروی ماډل د اوټولوګس نیوکلیوس پلپوسس د لمبر نخاع د فرعي کونډرال هډوکي کې د نصبولو له لارې رامینځته شو. ساینس. Rep. 6, 35102: 10.1038/srep35102 (2016).
ویشاپټ، ډي.، زینتي، ایم.، هوډلر، جي.، او بوس، این. د لمبر نخاع مقناطیسي ریزونانس امیجنگ: د ډیسک هیرنیشن او ساتلو، د اعصابو ریښو کمپریشن، د پای پلیټ غیر معمولي حالتونه، او د غیر علامتي رضاکارانو کې د اړخ ګډ اوستیوآرتریت خپریدل. کچه. راډیولوژي 209، 661–666، doi:10.1148/radiology.209.3.9844656 (1998).
کجایر، پي.، کورشولم، ایل.، بینډیکس، ټي.، سورینسن، جي ایس، او لیبوف-ایډ، کې. موډیک بدلونونه او د دوی اړیکه د کلینیکي موندنو سره. د اروپایی نخاعي ژورنال: د اروپایی نخاعي ټولنې رسمي خپرونه، د نخاعي خرابوالي اروپایی ټولنه، او د رحم د نخاعي څیړنې لپاره اروپایی ټولنه 15، 1312-1319، doi: 10.1007/s00586-006-0185-x (2006).
کویسما، ایم.، او نور. د ملا د ملا د ملا د پای په تختو کې موډیک بدلونونه: د منځني عمر نارینه کارګرانو کې د ملا د ټیټ درد او سیاټیکا سره خپریدل او اړیکه. نخاع 32، 1116–1122، doi:10.1097/01.brs.0000261561.12944.ff (2007).
ډی روس، اې.، کریسیل، ایچ.، سپریټزر، کې.، او ډالینکا، ایم. د هډوکي میرو د بدلونونو MRI د لمبر نخاع د تخریبي ناروغۍ کې د پای پلیټ ته نږدې. AJR. د راډیولوژۍ امریکایی ژورنال 149، 531-534، doi: 10.2214/ajr.149.3.531 (1987).
موډیک، ایم ټي، سټینبرګ، پي ایم، راس، جي ایس، مساریک، ټي جي، او کارټر، جي آر د ډیجنریټیو ډیسک ناروغي: د MRI سره د ملا د مغز بدلونونو ارزونه. راډیولوجي 166، 193-199، doi:10.1148/radiology.166.1.3336678 (1988).
موډیک، ایم ټي، مساریک، ټي جي، راس، جي ایس، او کارټر، جي آر د ډیجنریټیو ډیسک ناروغۍ امیجنگ. راډیولوژي ۱۶۸، ۱۷۷-۱۸۶، doi: ۱۰.۱۱۴۸/راډیولوژي.۱۶۸.۱.۳۲۸۹۰۸۹ (۱۹۸۸).
جینسن، TS، او نور. په عمومي نفوس کې د نیوورټیبرل انډپلیټ (موډیک) سیګنال بدلونونو وړاندوینې. د اروپایی نخاع ژورنال: د اروپایی نخاع ټولنې رسمي خپرونه، د نخاع د خرابوالي اروپایی ټولنه، او د رحم د نخاع د څیړنې لپاره اروپایی ټولنه، څانګه 19، 129-135، doi: 10.1007/s00586-009-1184-5 (2010).
البرټ، ایچ بي او مانیش، کې. موډیک د لمبر ډیسک هیرنیشن وروسته بدلونونه. د اروپایی نخاع ژورنال: د اروپایی نخاع ټولنې رسمي خپرونه، د نخاع د خرابوالي اروپایی ټولنه او د رحم د نخاع څیړنې لپاره اروپایی ټولنه 16، 977-982، doi: 10.1007/s00586-007-0336-8 (2007).
کیرتولا، ایل، لووما، کی، ویهماس، ټي، ګرونبلاد، ایم، او کاپا، ای. د موډیک ډول I بدلونونه کولی شي د ډیسک د چټک پرمختګ وړاندوینه وکړي: د 1 کلن احتمالي مطالعه. د اروپا د نخاع ژورنال 21، 1135-1142، doi: 10.1007/s00586-012-2147-9 (2012).
هو، زی جي، ژاو، ایف ډي، فانګ، ایکس کیو او فین، ایس ډبلیو موډیک بدلونونه: د لمبر ډیسک تخریب لپاره ممکنه لاملونه او ونډه. طبي فرضیې 73، 930-932، doi: 10.1016/j.mehy.2009.06.038 (2009).
کروک، ایچ وي د ډیسک داخلي ټوټه کیدل. د ۵۰ کلونو په اوږدو کې د ډیسک د پرولاپس ستونزې. نخاع (فیلا پا ۱۹۷۶) ۱۱، ۶۵۰-۶۵۳ (۱۹۸۶).
د پوسټ وخت: دسمبر-۱۳-۲۰۲۴